细胞衰老(Cell senescence)是细胞控制其生长潜能的保障机制,一般含义是复制衰老(Replicative senescence,RS),指正常细胞经过有限次数的分裂后,停止分裂,此时细胞虽然是存活的,但是细胞形态和生理代谢活性发生明显变化的现象。体外衰老细胞研究常用的生物学特征包括:1)不可逆的生长停滞;2)与衰老相关的β-半乳糖苷酶(senescence associated β-galactosidase, SA-β-gal)的活化。作为溶酶体内的水解酶,通常在pH 4.0的条件下表现活性,但是衰老细胞内其在pH 6.0的条件下表现活性,且随着传代次数的增加,细胞群体中表现衰老相关的β-半乳糖苷酶的细胞数目逐渐增加。
艾美捷细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒提供了一种易于使用和有效的方法来确定细胞
衰老。SA-β-半乳糖苷酶催化X-gal的水解,产生蓝色。每个试剂盒提供足够的量在35毫米培养皿中进行多达50次检测。
艾美捷细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒套件组件:
1. 100X Fixing Solution ( 40010): One tube – 1.5 mL of 25% Glutaraldehyde
2. Staining Solution A ( 40011): One tube – 1.5 mL of 500 mM Potassium Ferrocyanide
3. Staining Solution B ( 40012): One tube – 1.5 mL of 500 mM Potassium Ferricyanide
4. Staining Solution C ( 40015): One bottle – 4.5 mL of 1 M Citrate-Na2HPO4 Buffer, pH
6.0, 50 mM MgCl2
5. Staining Solution D ( 40016): One bottle – 4.0 mL of 5 M NaCl
6. X-gal Solution ( 40014): Two tubes – 1.5 mL of 40 mg/mL X-gal in DMF in each tube
艾美捷细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒相关研究:
1. CBA-080: CytoSelect™ 24-Well Anoikis Assay
2. CBA-081: CytoSelect™ 96-Well Anoikis Assay
3. CBA-231: 96-Well Cellular Senescence Assay Kit (SA-b-gal Activity, Fluorometric Format)
4. CBA-232: Quantitative Cellular Senescence Assay (SA β-Gal)
5. CBA-240: CytoSelect™ Cell Viability and Cytotoxicity Assay
6. AKR-100: b Galactosidase Staining Kit
试剂的制备:
•1X固定溶液:通过将提供的100X原液稀释成1:100的1X溶液,制备1X固定溶液
PBS。将稀释的溶液在室温下储存六个月。
•细胞染色工作溶液:根据
样本数量。以下图表适用于35mm板中的样品
相应地修改以适合其他培养板尺寸。