艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒测定原理：

该试剂盒提供了比色形式测量和监测细胞增殖，含有足够的试剂用于评估在96孔板中进行960次测定或在24孔板中进行192次测定。细胞可以被镀，然后用影响增殖的化合物或药剂。然后用增殖试剂检测细胞，在活细胞中由黄色四唑MTT转化为紫色福尔马赞形式细胞还原酶。细胞增殖的增加伴随着信号的增加，虽然细胞增殖（和信号）的减少可以表明化合物的毒性作用或次优的培养条件。该测定原理是基本的，可应用于大多数真核生物细胞系，包括贴壁和非贴壁细胞以及某些组织。这种细胞增殖试剂可用于检测细菌，酵母，真菌，原生动物以及培养的哺乳动物中的增殖和鱼细胞。

 

艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒结果示例：

下图显示了CytoSelect的典型结果™ MTT细胞增殖试验。以下数据仅供参考。该数据不应于解释实际后果 

图：人HEK 293细胞密度。HEK 293细胞以不同密度接种并允许其生长24小时。加入CytoSelect MTT细胞增殖后测定试剂，然后将细胞在37℃和5%CO2下孵育3小时，并用

洗涤剂溶液3小时。

艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒测定方案：

1.制备含有0.1-1.0 x 106的细胞悬液培养基中的细胞/ml。

2.将每孔100μL加入96孔细胞培养板或每孔500μL加入24孔细胞培养物中有或没有待测化合物的板。细胞在37°C和5%培养24-96小时加湿培养箱中的二氧化碳。

3.加入10μlCytoSelect™ MTT细胞增殖测定试剂，如果使用96-孔板，或24孔板的每个孔50µL。

4.在37°C和5%CO2下孵育平板3-4小时，直至可见紫色沉淀（细胞在光学显微镜下可以更精确地观察到沉淀物）

5.在96孔板的每孔中加入100μL去污剂溶液，或在24孔板的每孔中加入500μL去污剂溶液盘子。

6.在室温下孵育2小时至避光过夜。

注意：在井中与洗涤剂溶液长时间孵育可能导致沉淀或浑浊可以增加背景。如果观察到沉淀，将板在37℃加热10-20分钟并搅拌溶解沉淀物。

7.使用540-570nm作为主波长读取吸光度。

引用文献（部分）：

1. Yu, Z. et al. (2021). Receptor interacting protein 3 kinase, not 1 kinase, through MLKL-mediated necroptosis is involved in UVA-induced corneal endothelium cell death. Cell Death Discov.

7(1):366. doi: 10.1038/s41420-021-00757-w.

2. Koga, Y. et al. (2021). DNA-Aptamer Raised against Receptor for Advanced Glycation End Products Improves Survival Rate in Septic Mice. Oxid Med Cell Longev. 2021:9932311. doi:10.1155/2021/9932311.

3. Uranowska, K. et al. (2021). A chondroitin sulfate proteoglycan 4‑specific monoclonal antibody inhibits melanoma cell invasion in a spheroid model. Int J Oncol. 59(3):70. doi:10.3892/ijo.2021.5250.