ImmunoChemistry艾美捷ICT近红外(NIR)-FLIVO®示踪剂与无NIR-FLIVO染料对照分析结合使用。无NIR-FLIVO染料控制试验使用无NIR-FRIVO染料检测试剂(*Dylight®690游离染料)。注射时,游离染料对照物和示踪物试剂都会产生荧光信号,但只有示踪物会与活性胱天蛋白酶结合并留在凋亡细胞内,而与游离染料对照相关的信号代表背景噪声。
ImmunoChemistry Technologies简称"ICT",研究工具众多,包含细胞蛋白酶、细胞凋亡与细胞毒性检测试剂盒,同时还有高灵敏度的 ELISA开发试剂,包括包被液、封闭液、 冲洗液、 底物、 终止液、 板子等等。
背景;
FLIVO®试剂盒为体内检测胱天蛋白酶活性提供了一种简单而准确的方法。无NIR-FLIVO染料对照试验包含NIR荧光染料分子(不含半胱天冬酶靶向部分),并设计用于与NIR-FLIV 690示踪试验配合使用,以确定背景荧光信号。当注射到动物体内时,游离染料控制试剂和示踪试剂都会产生荧光信号,但只有示踪试剂会与活性胱天蛋白酶结合并保留在凋亡细胞内。由游离染料对照产生的荧光信号揭示了荧光试剂可能被捕获在动物的细胞、组织或身体内而没有与活性半胱天冬酶特异性结合的位置。在整个实验的背景下,与注射NIR-FLIVO示踪剂的动物产生的信号相比,这种荧光的基本水平被认为是背景噪声。
ImmunoChemistry 艾美捷NIR-FLIVO 690游离染料参数:
试剂名称NIR-FLIVO®690游离染料控制试剂(*Dylight®690游离染色剂)
目标背景荧光水平
激发/发射690 nm/709 nm
分析方法使用设计用于非侵入性活体动物成像的仪器,或者,切除的组织可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行分析
样本类型全动物荧光成像,切除组织
储存-20°C
组分:
套件9113:
2瓶NIR-FLIVO®690游离染料对照品(*Dylight®690游离染色剂),每瓶10次测试,每瓶47.7μg,#6307
1瓶10X注射缓冲液,5 mL,#6220
工具包手册
ImmunoChemistry 艾美捷NIR-FLIVO 690游离染料协议:
准备样品和对照品。
用45 mL diH20按1:10稀释10X注射缓冲液。
用50μL DMSO重组NIR-FLIVO 690游离染料。
用450μL 1X注入缓冲液稀释NIR-FLIVO 690游离染料1:10。
静脉注射50μL。
让NIR-FLIVO 690游离染料循环4小时。
想象动物。NIR-FLIVO690游离染料在690nm激发,在709nm发射。
如果不直接查看,则切除组织并处理样本以进行进一步分析。
可选:用其他染色剂(如Hoechst 33342或抗体)标记切除的样品。
如果需要,修复切除的样本。
用荧光显微镜或流式细胞仪分析切除的样品。