共价对接(Covalent Docking)
- 随着人们对共价抑制剂的发现越来越重视,越来越多的软件开始支持共价抑制的虚拟筛选。
- 常用的共价对接软件有CovDock,AutoDock4,FITTED,GOLD,ICM-Pro与MOE等。
- 共价抑制剂的典型特征是配体的亲电部分(弹头)和蛋白受体上的亲核残基(主要是半胱氨酸)之间形成化学键。
- 共价抑制剂的反应类型:迈克尔加成、亲核加成,亲核取代反应,开环反应,二硫化物的形成等。
准备
以EGFR靶点共价抑制剂Afatinib
为例,展示共价对接,对应的PDB为:4G5P
,可先下载备用!首先,从PDB数据库中下载复合物结构,导入至软件中,可发现Afatinib
与Cys797
形成共价键。
蛋白配体准备
选中4G5P,右击选择Split--->Into Ligands,Water,Other
选中4G5P_ligand,进行结构修复
配体准备
用Ligpre对小配体进行优化准备,准备过程与glide对接一样,命名为ligprep_Afatinib
蛋白准备
选中4G5P_Protein
,利用Protein preparation
进行蛋白准备,准备过程可以参见glide蛋白准备部分。
仅保留A链
点击左侧分子目录,将4G5P_ligand和4G5P_protein-hbon-opt
显示到窗口中
共价对接面板
点击Tasks
—>输入covdock
—>点击Covalent Docking
,打开Covalent Docking
面板
配体设置
Covalent Docking面板参数设置切换至Reaction Type选项卡;由于Afatinib是通过Michael受体丙烯酰胺与EGFR的CYS797共价结合;因此,反应类型Reaction Type的下拉菜单中选择Michael Addition即迈克尔加成反应;
小分子文件设置:Use ligands from:File
,选择刚刚准备好的ligprep_Afatinib-out.maegz
文件
如果是通过其他的方式反应形成共价键,可以选择其他的反应类型,具体可参考下表:
对接参数设置
共价对接有两种模式:
- 构象预测
(Pose Prediction)
,执行完整的协议以进行准确的构象预测 - 虚拟筛选
(Virtual Screen)
,跳过费时的步骤,例如旋转取样和最小化,以筛选大量配体。- 虚拟筛选至少比构象预测快10倍。如果要从大量配体中找到可能的共价结合剂,可选择虚拟筛选
(Virtual Screen)
。 - 配体数上限为10000,因此如果有更多配体,则必须分批运行。·如果要为几个配体找到合适的构象,可选择“构象预测”
(Pose Prediction)
。 - 每个配体的构象预测可能需要1-2小时。
我们这里选择Pose Prediction,即在Docking Mode
的选项下拉菜单中,选择Pose Prediction
(Thorough)。
- 虚拟筛选至少比构象预测快10倍。如果要从大量配体中找到可能的共价结合剂,可选择虚拟筛选
对接结果
点击File--->Import Structures-->
选择对接好的结果covalent docking_4G5P-Afatinib-VS-ok- out.maegz