SAM,也称为 AdoMet,充当修饰蛋白质和 DNA 所需的甲基的供体。SAM 的异常水平与许多异常有关,包括阿尔茨海默氏症、抑郁症、帕金森氏症、多发性硬化症、肝功能衰竭和癌症。
市面上,SAM甲基转移酶酶活性分析试剂盒非常少,而且很多都是贴牌而来。如何选择更加可靠的SAM甲基转移酶活性分析试剂盒?
艾美捷G-Biosciences SAM510系列——SAM甲基转移酶活性分析试剂盒,提供一种连续动力学酶偶联测定方法,可连续监测纯化的SAM依赖性甲基转移酶,而无需使用放射性标记或终点测量。 这是用于蛋白SAM甲基转移酶的灵敏的酶偶联试验。
1.SAM510: SAM Methyltransferase AssaySAM甲基转移酶活性分析试剂盒(比色法)【GBS-786-430】 100T 样本:纯化的SAM甲基转移酶
2.SAM-fluoro: SAM Methyltransferase Assay SAM甲基转移酶活性分析试剂盒(荧光法)【GBS-786-431】100T 样本:纯化的SAM甲基转移酶
说明:
1.试剂盒需干冰运输,-80℃保存
2.可替代长货期产品:Sigma,CBA096
3.仅供科研使用,不得用于医疗.
艾美捷SAM甲基转移酶活性分析试剂盒原理:
从SAM中去除甲基会产生S-腺苷同型半胱氨酸,通过所含的腺苷同型型半胱氨酸核苷酶将其快速转化为S-核糖同型半胱氨酸和腺嘌呤。这种快速转化阻止了腺苷同型半胱氨酸的积累及其对甲基化反应的反馈抑制。最后,腺嘌呤脱氨酶将腺嘌呤转化为次黄嘌呤,然后转化为尿酸盐和过氧化氢。过氧化氢的产生速率通过510nm处吸光度的增加用比色法测定。由于腺苷高半胱氨酸核苷酶的特异性,该测定法可适用于任何纯化的SAM依赖性甲基转移酶或产生5-腺苷高半胱氨酸或5“-甲硫腺苷的纯化酶。
艾美捷SAM甲基转移酶活性分析试剂盒特色:
1.纯化甲基转移酶的动力学分析或筛选甲基化抑制剂。
2.用于动力学研究的连续酶偶联试验。
3.比色法,非放射性测定。
4.与所有试剂一起提供,包括阳性对照。
5.适用于产生S-腺苷高半胱氨酸或5 '-甲硫腺苷的酶。
SAM甲基转移酶活性分析试剂盒-Nature文章鉴赏:
IF=69, 《MMSET regulates histone H4K20 methylation and 53BP1 accumulation at DNA damage sites》,Nature
体外组蛋白甲基转移酶测定。
用血凝素(HA)标记抗体从293T细胞中表达并纯化了HA-MMSET和HA-53BP1。 重组组蛋白4蛋白来自Upstate。 根据制造商的说明进行体外组蛋白甲基转移酶测定(SAM510:SAM甲基转移酶测定试剂盒,G-Biosciences)。 简而言之,所有蛋白质都用0.1M Tris-HCl,pH 8.0透析。 20mM HA-MMSET(或HA-MMSET(S102A)突变体)和20mM H4(或HA-53BP1)用于每个反应。 在37 ℃下每10 - 30秒测量510nm处的吸光度,直到增加的吸光度达到平台或通过在SDS缓冲液中煮沸终止反应,通过15% SDS-PAGE分离它们的内容物,并通过用抗H4K20Me2抗体(Upstate)进行免疫印迹来观察H4的甲基化。