艾美捷Immunochemistry MitoPT JC-1测定利用荧光染料JC-1检测线粒体膜去极化。当积聚在带负电的极化线粒体中时,JC-1发出橙色荧光。当线粒体膜电位在凋亡或代谢应激的细胞中崩溃时,JC-1试剂分散在细胞中并发出绿色荧光。使用流式细胞仪、荧光平板读取器或荧光显微镜分析结果。
线粒体膜电位的丧失表明细胞凋亡。ICT的MitoPT JC-1测定利用电位荧光染料JC-1检测线粒体膜通透性和膜去极化。JC-1染料具有分散在整个分子结构中的离域正电荷。此外,其亲脂性溶解性使其易于渗透膜并穿透活细胞。JC-1染料进入带负电荷的线粒体,在那里聚集并在激发时发出橙色荧光。当凋亡细胞中线粒体膜电位崩溃时,MitoPT JC-1分布在整个细胞溶胶中。使用流式细胞仪、荧光平板读取器或荧光显微镜分析结果。
艾美捷Immunochemistry MitoPT JC-1试剂盒化学性质:
试剂名称JC-1
靶向线粒体去极化
激发/发射488 nm/590 nm和527 nm
分析方法流式细胞术、荧光显微镜、荧光板读取器
样品类型细胞培养
储存-20°C
协议:
准备样品。
使用CCCP创建控件。
用diH2O以1:10稀释10X测定缓冲液。
用DMSO重组MitoPT JC-1。
用1X测定缓冲液稀释MitoPT JC-1。
将MitoPT JC-1添加到每个样本中。
培养15-30分钟。
清洗细胞:加入1X测定缓冲液并旋转细胞(两次)。
使用荧光显微镜、荧光板读取器或流式细胞仪进行分析。MitoPT JC-1在488nm处激发。聚集的MitoPT JC-1(橙色)在590 nm发射,单体MitoPT JC-1(绿色)在527 nm发射。
艾美捷Immunochemistry MitoPT JC-1试剂盒组分:
Kit 911: 400 Tests
MitoPT JC-1 Reagent, 100 Tests, #6260
10X Assay Buffer, 125 mL, #6259
CCCP, 50 mM, 600 µL, #6258
Kit Manual
Kit 924: 100 Tests
MitoPT JC-1 Reagent, 100 Tests, #6261
10X Assay Buffer, 60 mL, #685
CCCP, 50 mM, 125 µL, #6257
Kit Manual
相关文献:
Funakoshi, A;Honda, T;Ito, T;Tokura, Y. Cholecystokinin receptor antagonist suppresses melanoma growth by inducing apoptosis of tumor cells. JID Innovations. 2022 September 1; doi: 10.1016/j.xjidi.2022.100153. Abstract
Zhong, G;Long, H;Zhou, T;Liu, Y;Zhao, J;Han, J;Yang, X;Yu, Y;Chen, F;Shi, S. Blood-brain barrier Permeable nanoparticles for Alzheimer's disease treatment by selective mitophagy of microglia. Biomaterials. 2022 August 8; doi: 10.1016/j.biomaterials.2022.121690. Full Text