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Cyanine3 NHS ester是一种荧光染料,可用于将含有游离氨基(-NH2)的生物分子如蛋白质、抗体、肽段、核酸等进行标记和共价结合。这个过程通常称为NHS酯化反应,它是一种特异性的化学反应,用于在生物分子中引入荧光标记。
**标记生物分子和Cyanine3 NHS ester的共价结合过程如下:
**1. 准备样品:****首先,将含有游离氨基的生物分子样品(如蛋白质或抗体)与缓冲液混合,并保持在适当的pH范围内,以确保反应的特异性和高效率。
**2. 加入Cyanine3 NHS ester:**将Cyanine3 NHS ester溶液加入样品中,充分混合,使其与生物分子中的游离氨基发生反应。在这个过程中,Cyanine3 NHS ester的NHS基团与生物分子中的氨基反应,形成稳定的酰胺键,从而将荧光标记共价结合到生物分子上。
**3. 反应:**反应的时间和温度根据具体的实验条件而定,通常在室温下进行。
**4. 洗涤:**标记完成后,对样品进行洗涤,去除未反应的Cyanine3 NHS ester和其他杂质。这有助于提高标记物的纯度,并降低自发荧光的背景信号。
**5. 荧光成像和分析:**标记完成后的生物分子样品可以通过荧光显微镜等设备进行成像和观察。Cyanine3的荧光发射波长在红色范围内,适用于低背景自动荧光的条件下进行成像。
通过Cyanine3 NHS ester的共价结合,生物分子可以被标记上荧光探针,从而实现对它们在细胞或生物样品中的可视化成像和检测。这在生物学研究和生物医学领域中有着诸多的应用,帮助研究者深入了解生物分子的定位、相互作用和功能。
CY5 azideCY5 alkyne
CY5-Hylauronic acid
CY7-Hylauronic acid
Sulfo-CY3 azide
Sulfo-CY5 COOH
Sulfo-CY3 COOH
CY5 hydrazide
FITC-Biotin
FITC-NHS
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