艾美捷nickases内切酶组分:
NLS-Cas9(D10A) Nickase(0.1 μg/μl) 500 μL
10×Reaction Buffer 1 ml
艾美捷nickases内切酶切割活性检测:
NLS-Cas9(D10A) Nickase(0.1 μg/μl) 500 μL
10×Reaction Buffer 1 ml
经多次柱纯化,SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的条带,纯度达 95%;内毒素含量< 0.1EU/μg;qPCR 方法检测无大肠杆菌基因组残留;无 RNase、核酸内、外切酶污染。
体外切割体系(20μL):
Supercoiled DNA 200 ng
sgRNA 200 ng
NLS-Cas9(D10A) Nickase 50-100 ng
10×Reaction Buffer 2 μl
RNase Free Water To 20 μl
37 ℃保温 1 h、70℃保温 10 min
注:在反应体系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl,防止RNase 污染。
艾美捷nickases内切酶相关研究:
NLS-Cas9核酸酶
Cas9(D10A)镍基
Cas9(H840A)镍基
Cas9(D10A,H840A)核酸酶
sgRNA体外一步转录试剂盒
sgRNA筛选和基因型确认试剂盒