艾美捷nickases内切酶活性检测及相关研究

news2024/11/20 12:29:16

艾美捷nickases内切酶组分:

NLS-Cas9(D10A) Nickase(0.1 μg/μl) 500 μL

10×Reaction Buffer 1 ml

艾美捷nickases内切酶切割活性检测:

NLS-Cas9(D10A) Nickase(0.1 μg/μl) 500 μL

10×Reaction Buffer 1 ml

经多次柱纯化,SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的条带,纯度达 95%;内毒素含量< 0.1EU/μg;qPCR 方法检测无大肠杆菌基因组残留;无 RNase、核酸内、外切酶污染。

体外切割体系(20μL):

Supercoiled DNA 200 ng

sgRNA 200 ng

NLS-Cas9(D10A) Nickase 50-100 ng

10×Reaction Buffer 2 μl

RNase Free Water To 20 μl

37 ℃保温 1 h、70℃保温 10 min

注:在反应体系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl,防止RNase 污染。

艾美捷nickases内切酶相关研究

NLS-Cas9核酸酶

Cas9(D10A)镍基

Cas9(H840A)镍基

Cas9(D10A,H840A)核酸酶

sgRNA体外一步转录试剂盒

sgRNA筛选和基因型确认试剂盒

 

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