高效减少组织自发荧光，提高信噪比

news2024/10/2 11:55:45

在免疫组化检测过程中，许多样本组织会产生可通过各种波长滤光片的组织内源性自发荧光，干扰抗体标记的目的蛋白荧光的观察，甚至导致实验失败。为了解决免疫组化实验中的自发荧光，VectorLabs公司（国内代理商欣博盛生物）专门开发了一款Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit试剂盒，该产品旨在去除组织切片中由于醛固定、红细胞以及胶原蛋白/弹性蛋白结构造成的自发荧光。该试剂使用方便，无需稀释操作，为即用型试剂。该试剂盒中含有防自发荧光效果excellent的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片剂（含或不含DAPI两种）。客户无需单独购买封片剂，经济、实用。

注意：该试剂盒对脂褐素造成的组织自发荧光无效。

● 试剂盒组成：

a. Vector®TrueVIEW™ Reagent A 5ml b. Vector®TrueVIEW™ Reagent B 5ml c. Vector®TrueVIEW™ Reagent C 5ml d. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 2ml e. VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media with DAPI 2ml

其中，货号SP-8400包含a,b,c,d四个组分；货号SP-8500包含a,b,c,e四个组分

● 产品使用方法：

	将ReagentA、B、C以1:1:1的比例混合。（注意混合顺序，先将A和B以1:1比例混合10s，再加入C,混匀10s）
	将混好后的TrueView试剂滴加到组织样本切片上，将样本完全覆盖，孵育2-5min
	使用PBS缓冲液洗片5次，除去多余缓冲液，VECTASHIELD Vibrance Media封片后观察

● 产品特征

A 显著降低背景染色并保留特异性抗原染色； B 提高信噪比； C 产品稳定，储存在滴瓶中，使用方便； D 操作简单，快速；整个染色过程仅需2-5min； E 为使用者提供清晰、明确、真实的染色结果； F 适用于多种荧光染料的自发荧光去除，包括Alexa488，Alexa 594，DyLight 488，DyLight 594，FITC，Cyanine 5和GFP；

G SP-8500试剂盒中的封片剂中DAPI浓度较高，可对细胞核进行清晰的染色。

● 产品对自发荧光淬灭效果:

◆ 右图为经Vector®TrueVIEW™kit处理后，人肾脏组织切片中自发荧光淬灭的百分比与处理时间之间的关系。 ◆ Note：2分钟内即可达到最大淬灭效果。

揭秘：防止组织自发荧光“轻骑兵”——Vector True VIEW™ Kit快速获得高质量图片

● 产品应用举例：

＞案例一

未经任何处理	使用Vector®TrueVIEW™处理

◆ 上图为人脾脏组织染色结果：使用VectaFluor TM Duet试剂盒（DK-8818）检测的mouse anti-CD20（red）和rabbit anti-Ki67（green）对人脾组织切片的染色。 ◆ 左图为未经任何处理的染色结果， ◆ 右图为使用TrueVIEW™Autofluorescence Quenching试剂盒染色结果。于未经处理的染色结果相比，经TrueVIEW™Autofluorescence Quenching试剂盒处理后，自发荧光显著减少。

＞案例二

	◆ A-D图为人肾脏切片（石蜡切片）染色结果，实验中使用anti-AE1 /AE3抗体对角蛋白进行染色（绿色）。◆ A图未经处理， ◆ B-D图经TrueVIEW™Quencher Kit处理。自发荧光明显减弱。延长曝光时间，阳性信号强度也随之增强。

＞案例三

未经任何处理

使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI处理

揭秘：防止组织自发荧光“轻骑兵”——Vector True VIEW™ Kit快速获得高质量图片

◆ 上图为人胰腺组织染色结果：绿色为insulin的染色。
◆ 左图为未经任何处理的染色结果，
◆ 右图为使用TrueVIEW Treatment Mounted with Vibrance + 3x DAPI（SP-8500）试剂盒染色结果。与未经处理的染色结果相比，经该试剂盒处理后，自发荧光显著减少，核染色显著增强。

＞案例四

未经处理（内源性自发荧光）	经TrueVIEW™Quencher Kit处理

Company A	Company B	Company C

Copper Sulfate Solution	Sodium Borohydride	Sudan Black B

● 产品订购信息 Vector® True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit

产品	货号	规格	染色切片数
Vector® True VIEW™Autofluorescence Quenching Kit	SP-8400	15ml	100-150
Vector® True VIEW™Autofluorescence Quenching Kit	SP-8500	15ml	100-150
VECTOR TrueVIEW Autofluorescence Quenching Kit (3ml)	SP-8403	3ml	~30
VECTASHIELD® HardSet™Antifade Mounting Medium	H-1400	10ml	100-150
VECTASHIELD® HardSet™with DPI Antifade Mounting Medium	H-1500	10ml	100-150