探秘音乐疗法——基于音乐的喂养环境对小鼠肠道菌群影响的研究

news2024/12/22 13:19:12

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音乐对身心的影响

近年来,环境动物生理心理的相关研究越来越多。环境因素的丰富性和多样性是改善动物生理心理状态的重要研究参数。

环境因素指的是正常环境,在这种环境中,动物通过获得环境激励以做出有益的增强,使它们能够正常表达其行为和心理活动,从而改善健康状况生长性能

★ 音乐对人体健康具有益处

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音乐这种声波刺激,影响着动物的生理和心理。以前的研究表明,伴随音乐喂养动物会影响它们的生长性能动物生产。音乐的节奏鼓励肌肉活动并激发机体的活力。当音乐的节奏接近机体的心律时,会刺激机体分泌调节荷尔蒙

美国开展的一项音乐疗法研究表明,它可以缓解情绪改善消化平衡心理状态促进疾病康复

★ 音乐可以辅助调节肠道菌群

中国在先秦时期就将五行音乐疗法(FEMT)引入医学领域。中国的五行音乐疗法有着悠久的历史和完整的体系。科学家观察到五行音乐疗法可以缓解焦虑症状改善空间认知调节肠道菌群辅助药物治疗

五行音乐疗法——中医理论描述了五种音乐音调、五种器官和五种元素之间的相互联系,五音分属五行,通肝、心、肺、脾、肾五脏。用角、徵、宫、商、羽五种不同的音调的音乐来治疗相对应的疾病

虽然目前音乐疗法治疗疾病存在一定的局限性,但音乐疗法已成为临床常用的辅助治疗手段。

然而,关于喂食过程中听音乐对肠道微生物影响的报道较少。本文通过最新的研究评估喂养时伴随音乐对小鼠肠道微生物生长性能的影响,为音乐治疗提供理论支持。

01 动物临床实验症状

•实验选用生长状况良好、健康的小鼠

在整个研究过程中,没有动物患抑郁症、疾病或死亡,尸检和电子显微镜成像均未显示宏观和微观病理。

整个实验期间的小鼠体重

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•对照组小鼠体重在前16天高于音乐干预组

对照组小鼠体重在30天喂养期的最初16天高于音乐干预组,第4天两组差异显著(P<0.05)。

•19天后音乐干预组体重开始高于对照组

然而,在第19天后,两组之间的小鼠体重发生了翻天覆地的变化,音乐干预组的体重在第19-30天高于对照组。

其中,第25天(38.444:39.600)、第28天(39.120:40.238)和第30天(40.120:40.838)组间差异有统计学意义(P<0.01;P<0.05;P < 0.05)。

•音乐干预组小鼠情绪和状态更活跃

值得注意的是,在喂食期间,我们发现音乐干预后的小鼠在情绪状况活动状态方面比对照小鼠更活跃

02 肠道微生物多样性分析

匹配了获得的合格序列,并进行了α-多样性分析,以评估对照组和音乐干预组之间肠道菌群多样性丰度的差异

✦伴随音乐的喂养降低了肠道菌群丰度

结果表明,对照组的微生物多样性和丰度高于音乐干预组,两组间chao1指数差异显著(P<0.05)。其他三个指数(Shannon指数、ACE指数和Simpson指数)没有显示出统计差异。

注:chao1指数——又称Chao1丰富度指数或Chao1多样性指数,是一种用于衡量群落物种多样性的指标。

综上所述,可以看出伴随音乐的喂养过程降低了肠道菌群的丰度

✦β多样性较低

利用QIIME软件计算β多样性分析,比较样本间物种多样性的相似性

PCoA分析基于未加权的二进制 jaccard(P>0.05)和加权的 bray curtis(P>0.05)显示两组之间没有统计学差异,表明两组之间具有高相似性低物种多样性

α和β多样性分析

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主要微生物组成

通过使用 QIIME2 软件对来自不同物种的微生物类群进行分类,评估了门和属水平上优势样本的相对比例。

✦两组中都以厚壁菌和变形菌为主

结果表明,对照组中门水平的优势菌为厚壁菌门Firmicutes)占42.19%,变形菌门Proteobacteria)占19.57%,蓝藻Cyanobacteria)占13.05%和拟杆菌门Bacteroidetes)占9.85%,占总肠道菌群的84.66%。

在音乐干预组中,门水平的优势细菌为厚壁菌门Firmicutes)占61.42%,变形菌门Proteobacteria)占16.00%、蓝藻占7.07%和拟杆菌门Bacteroidetes)占4.46%,占微生物总数的88.94%。两组的微生物组成(属水平)均显示乳杆菌Lactobacillus)为优势群落。

此外,uncultured_bacterium_f_Enterobacteriaceae(3.97%比5.83%)和uncultured_bacterium_f_Muribaculaceae(3.47%比1.62%)是两组中的优势菌株

小结

从以上结果可以得出结论,在小鼠喂食过程中进行音乐干预可以改变肠道微生物的组成

热图通过色带和接近程度表明多个样品的肠道微生物种群的异同

结果表明,无论细菌门水平还是在属水平,两组样品之间的微生物丰度相似性较低,但组内样品之间的差异较小微生物丰度相似

小鼠肠道微生物组成分布和热图

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注:(A) 门级的优势细菌种类和丰度;(B) 属级的优势细菌种类和丰度;(C) 门级样品间微生物相似性热图;(D) 属级样品间微生物相似性热图。

微生物差异

✦两组之间厚壁菌丰度存在显著差异

使用 Metastats 分析,研究了两组微生物的门和属水平组成的统计学差异。结果显示厚壁菌门的相对丰度存在显著差异(对照组0.422 ± 0.056与音乐干预组0.614 ± 0051,P < 0.05)。

Metastats分析——组间群落显著性差异分析,用于寻找组间差异物种

✦对照组丰度高于音乐干预组的菌群

在属水平上发现了11个具有统计学意义的分类群,而对照组在以下菌种丰度高于音乐干预组

uncultured_bacterium_o_Microtrichales

(P<0.0001);uncultured_bacterium_f_Micromonosporaceae

(P<0.05);

Pseudolabrys (P<0.05);

Methylobacterium (P<0.05);

uncultured_bacterium_f_Muribaculaceae

(P<0.05);

Ruminococcaceae_UCG-005 (P<0.05) 。

✦音乐干预组丰度高于对照组的菌群

与此相反,以下菌种丰度音乐干预组高于对照组

uncultured_bacterium_f_Atopobiaceae(P<0.01);Ileibacterium(P<0.01);Lachnospiraceae_FCS020_group(P<0.05);Serratia(P<0.05);

Dietzia (P<0.05)。

门和属水平肠道细菌丰度的统计差异

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注:所有数据均表示平均值±SD(*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001)

生物标志物

考虑到 Metastats 分析对两组间细菌相对丰度差异的局限性,进行了 LEfSe 分析以寻找对照组音乐干预组之间具有统计学差异的生物标志物

LEfSe分析是一种将非参数的Kruskal-Wallis以及Wilcoxon秩和检验,与线性判别分析效应量相结合的分析手段, 能够在不同组间寻找具有统计学差异的Biomarker,其要求组内样本数≥3

结果表明,除了上述显著差异的细菌外,还回收了15个具有统计学差异的生物标志物,对照组中最主要的群体是疣微菌门(Verrucomicrobia)、δ-变形菌(Deltaproteobacteria)和酸微菌(Acidimicrobiia),而Lleibacterium大洋芽孢杆菌Oceanobacillus)在音乐干预组中显著表达

LEfSe分析和LDA评分揭示了细菌丰度的显著差异

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注:(A) LDA分数>3.0被认为具有统计学意义。(B) 分支图描绘了与对照组和音乐干预组相关的肠道微生物群的系统发育分布

相关性分析

在生态学领域,相关性通常用于构建可用于分析物种群落数据(共现模式)或组合多个数据集进行分析的网络模型。以python为基础,使用前50个属来创建基于网络的关联,该关联表示78个节点、237个边和6个社区。

✦乳杆菌是两组中最丰富的菌

我们发现,在基于网络的相关性分析中,乳杆菌Lactobacillus)是两组中最丰富的细菌。

此外,音乐干预后小鼠(Jm组)体内乳杆菌丰度高于对照组(47.34%比28.03%),而Phaseolus_acutifolius_tepary_bean丰度低于对照组(6.24% 比 12.36%)。

✦乳杆菌与其他菌属的关联性

乳杆菌与Parabacteroides(0.6364)、Faecalibacterium(0.7455)、幽门螺杆菌(0.7720)、RB41(0.6485)呈负相关。

Phaseolus_acutifolius_tepary_beanCandidatus_Koribacter(0.7173)和Breznakia(0.7195)呈正相关,与泛菌属(0.66060)、肠球菌属(0.6809)和Ruminococcacee_UCG-014(0.6606)呈负相关

物种间相关性分析

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线条描绘了两个物种之间的相关性,线条粗细描绘了相关性的强度。根据线条的颜色,橙色表示正相关绿色表示负相关

03  音乐对动物生理的影响

已发现音乐对身体有积极的影响,引起协调的共振,促进器官节奏的和谐,以及一系列内分泌转变

促进动物生长和身体发育

✦提高动物的生长性能

先前的研究表明,音乐和检查声音的混合会显著提高小猪生长性能(同样的饲料量下长了更多的肉)。然而,有些音乐(例如重金属,频率<20赫兹,95–105分贝)具有相反的效果。

注:这项研究是在 El Condor Pasa 音乐上进行的,该音乐风格自然且没有过度分层。

在为期30天的喂养实验(有音乐干预)中,发现小鼠的体重在第25天时明显高于对照组。此外还显示,在音乐干预后,动物消耗了更多的食物,体重明显增加

✦促进对营养的吸收

一些研究发现,音乐可以促进免疫系统和肠道微生物对营养的吸收,同时还可以减轻噪音的负面影响。总的来说,表明音乐可以改善体重促进小鼠的生长和身体发育

调节肠道微生物

✦增强肠道菌群的活性

先前的研究表明,音乐疗法可以减少抑郁症,它还会影响消化系统的协调共振、生长激素的分泌并增强肠道菌群的活性和多样性

肠道微生物群是动物肠道中的微生物群落,在微生物学医学遗传学等肠道微生物群相关领域中观察到越来越多的研究趋势。

小鼠胃肠道α-多样性和PCoA分析表明,与对照组相比,音乐干预组肠道微生物发生了变化。有趣的是,整个多样性分析揭示了音乐组中组内样本的高度聚集和组内相似性的显著增强

✦有助于肠道菌群的相对稳定

我们发现喂食期间的音乐干预从统计学上增加了厚壁菌乳杆菌的丰富度,同时成倍减少了蓝藻、拟杆菌、肠道微生物中的Phaseolus_acutifolius_tepary_beanuncultured_bacterium_f_Muribaculaceae

厚壁菌门是数量最多的细菌,大多数为革兰氏阳性菌,呈球形或杆状,厚壁菌门的许多成员是有益菌,如乳杆菌、芽孢杆菌、双歧杆菌、丁酸梭菌等。

表明肠道微生物多样性的减少与特定细菌的减少或个别菌株的过度生长有关。这表明喂养期间的音乐干预可以减少离散的微生物群有助于相对稳定性

✦肠道微生物的稳态有助于防止其他疾病

肠道微生物群的稳态被发现是外部病原体入侵和定植的重要障碍,肠道微生物群的改变可能与多种疾病有关。

除了胃肠道疾病和代谢疾病,肠道菌群还与多种全身性疾病有关,例如神经系统疾病呼吸系统疾病心血管疾病肿瘤疾病

研究表明,乳杆菌等微生物可以产生乙酸盐、乳酸和抗菌物质,可以防止病原体干扰健康。 此外,它们还有助于维持肠道微生态平衡,预防和抑制肿瘤的发生,增强动物免疫力促进消化,合成氨基酸和维生素。

04  总结

总体而言,本研究描述了小鼠在进食期间听音乐情况下肠道微生物群的变化。

结果表明,音乐干预后肠道微生物群发生了显著变化,其特征是肠道细菌多样性下降和小鼠肠道微生物群组成发生变化。此外,在伴随音乐喂养小鼠期间,有益菌的数量增加,而致病菌或条件致病菌减少

这些结果有助于理解音乐肠道微生物群之间的关系,以及肠道微生物群会根据不同的喂养环境发生变化。本研究也为音乐疗法改善动物生长环境提高动物生理及心理状态提供了理论依据。

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关于肠道菌群干预的相关措施有很多,比如说饮食、睡眠、运动、益生菌、粪菌移植、天然产物、抗生素等,这些在我们之前写过的相关主题的文章都有涉及;而关于音乐对肠道菌群的干预的研究较少,本文对此做一个详细介绍,为音乐疗法的有效性提供了理论依据。

音乐是我们日常生活中轻而易举就能接触到的,可以说是一种非常便捷的治疗方式,因为它不需要使用任何药物或器械,无需去医院等特殊的场所。通过本文的研究可以窥见音乐疗法对于干预人类肠道菌群的潜力。

对于研究人员而言,未来可以更深入了解音乐疗法的作用机制,通过研究不同类型的音乐、不同的音乐治疗对象,探索更多有效的个性化的音乐调节肠道菌群的方案,从而更好地应用于临床实践中,让大众有机会感受音乐疗法带来的不可思议的力量。

参考文献

Niu J, Xu H, Zeng G, Wang P, Raciheon B, Nawaz S, Zeng Z, Zhao J. Music-based interventions in the feeding environment on the gut microbiota of mice. Sci Rep. 2023 Apr 18;13(1):6313.

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