一、名词解释
Motif分析是一种在生物信息学和计算生物学中广泛应用的技术,用于识别DNA、RNA或蛋白质序列中具有生物学功能的短保守序列模式(motif)。这些motif通常与特定的生物学功能相关,如DNA中的转录因子结合位点、RNA中的剪接位点或蛋白质中的功能结构域。
在DNA或蛋白的同源序列中,不同位点的保守程度是不一样的,一般来说,对DNA或蛋白质功能和结构影响比较大的位点会比较保守,其它位点则不是很保守。这些保守的位点就称为“模体(motif)”。motif最先是通过实验的方法发现的。motif这个单词形容一种反复出现的模式,而序列motif往往是DNA上的反复出现的模式,并被假设拥有生物学功能。例如,具有序列特异性的蛋白的结合位点(如转录因子)或者涉及到重要生物过程的(如RNA起始、RNA终止、RNA剪切等)。目前识别出的motif越来越多,如TRANSFAC和JASPAR数据库中有大量转录因子的motif可以帮助了解基因家族成员之间的关系,推断它们的功能和调控机制。
motif分析主要包括以下三个方面:
(1)motif 鉴定
(2)motif seqlogo图
(3)motif 分布
二、实操
1. MEME工具箱
http://meme-suite.org/index.html
MEME套件允许在未对齐的核苷酸或蛋白质序列集合中发现新的基序,并进行各种基于基序的分析
1.1 MEME Suite包含多个小工具,功能全面,能够满足不同的motif分析需求:
MEME:用于发现一组序列中的保守motif。
STREME:用于发现简单、短的motif。
CentriMo:用于识别在特定位置(如转录起始位点附近)富集的motif。
AME:用于motif富集分析。
FIMO:用于在序列中扫描已知motif。
Tomtom:用于motif间的比较。
1.2 Motif分析的主要步骤
数据准备:从基因组、转录组或蛋白质序列中获取感兴趣的序列。数据通常来自高通量测序技术(如ChIP-seq、RNA-seq)或蛋白质组学数据。
序列比对:通过多序列比对识别序列中的保守区域,常用工具包括ClustalW、MAFFT和MUSCLE。
模式发现:利用MEME Suite中的工具发现序列中的motif。
模式验证:通过实验数据或数据库(如TRANSFAC、JASPAR)中的已知motif进行验证,确保发现的motif具有生物学意义。
功能注释:将发现的motif与基因功能、调控网络和生物学过程关联起来,以理解其生物学作用。
应用:motif分析在基因调控网络构建、疾病研究和药物靶点发现等方面具有重要应用。
Motif分析是一种强大的工具,能够帮助研究人员识别和理解生物序列中的功能模式,对于揭示基因调控机制和探索生物学功能具有重要意义。MEME Suite作为首选工具,提供了全面的功能和易用的界面,使得motif分析更加高效和准确。
流程图:
1. Motif Discovery(基序发现)
用于预测输入序列上的motif信息,支持DNA,RNA或者蛋白序列。
实现该功能的工具有许多,以MEME为例
点击Metif Discovery-MEME-提交文件--设置motif数目
结果网页主要关注2个文件
(1)MEME HTML output
(2)MEME XML output
2. 利用Tbtools软件将进化树、基因结构和motif图进行组合
参考文献:
原文链接:https://blog.csdn.net/2301_78630677/article/details/132155210
Genome-wide identification of the SPL gene family in Tartary Buckwheat (Fagopyrum tataricum) and expression analysis during fruit development stages | BMC Plant Biology | Full Text