Kamiya丨Kamiya艾美捷AREG酶联免疫吸附试验原理

news2024/11/24 5:26:20

Kamiya艾美捷AREG酶联免疫吸附试验预期用途:

该试剂盒是一种用于体外定量测量大鼠AREG的夹心酶免疫测定法血清、血浆和其他生物流体。仅供研究使用。不用于诊断程序。

存储:

所有试剂应按照小瓶上的标签保存。校准器、检测试剂A、检测试剂B和96孔带板应在收到后储存在-20°C。这个未使用的胶带应保存在密封袋中,并提供干燥剂,以尽量减少受潮空气打开的测试试剂盒将保持稳定,直到显示的到期日期,前提是按照规定储存在上面。

Kamiya艾美捷AREG酶联免疫吸附试验原理

本试剂盒中提供的微量滴定板已预先涂有AREG特异性抗体。然后将校准物或样品加入适当的微量滴定板孔中,加入生物素偶联物AREG特异性抗体制剂。接下来,结合辣根过氧化物酶(HRP)的阿维丁是添加到每个微孔板孔中并孵育。然后向每个孔中加入TMB基质溶液。只有那些含有AREG、生物素结合抗体和酶结合Avidin的孔将表现出颜色的变化。通过加入硫酸溶液终止酶-底物反应并且在450nm±10nm的波长下用分光光度法测量颜色变化。然后通过将样品的外径与校准曲线。

校准器:

用1.0 mL校准品稀释剂重新配制校准品,在室温下保持10分钟,轻轻摇动(不要起泡)。储备溶液中校准品的浓度为2000 pg/mL。请准备7支含有0.5 mL校准稀释剂的试管,并制作一个双稀释系列如下图所示。在下一次转移之前,彻底混合每根管。设置7个点稀释的校准品,如2000 pg/mL、1000 pg/mL,500 pg/mL和250 pg/mL以及125 pg/mL或62.5 pg/mL,

31.2 pg/mL,最后一支带有校准稀释剂的EP管为空白,为0 pg/mL。

Kamiya艾美捷该试剂盒样品制备

1.用户应计算整个过程中可能使用的样本量测验请提前预留足够的样品。

2.分析前请预测浓度。如果这些值不在校准曲线,用户必须为其特定实验确定最佳样品稀释度。

3.如果手册中未指明样品,则进行初步实验以确定套件是必要的。

4.通过化学裂解缓冲液制备的组织或细胞提取样品可能导致意外的ELISA由于某些化学品的影响而导致的结果。

5.由于来自其他来源的抗原与用于Kamiya的试剂盒(例如,抗体靶向构象表位而非线性表位),一些天然或Kamiya的试剂盒可能无法识别来自其他制造商的重组蛋白。

6.受细胞活力、细胞数量和采样时间等因素的影响试剂盒可能检测不到细胞培养上清液。

7.建议在试验中使用不长时间储存的新鲜样品。否则,蛋白质降解并且在这些样品中可能发生变性并最终导致错误的结果。

 

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