制备大量单抗腹水就选博奥龙腹水专用佐剂

news2024/11/17 8:37:37

博奥龙Biodragon腹水专用佐剂是一种预先注入机体内,能增强机体对抗原的免疫应答能力或改变免疫应答类型的辅助物质。主要用于在单克隆抗体腹水制备中,在小鼠腹腔内接种杂交瘤细胞前,注射本佐剂到腹腔内,可以诱导杂交瘤细胞在腹腔内快速增殖,并产生和分泌更多的抗体,腹水产生的量是普通佐剂出量的1.5~2倍且单抗腹水效价不变。

     大量生产单克隆抗体的方法主要有三种:

     1、大量培养杂交瘤细胞,从细胞培养上清液中获取的抗体含量为10~60μg/ml;

    2、将对数生长期的杂交瘤细胞按1~3×10^7/ml接种于小鼠皮下,每处注射0.2ml,每只注射2~4个点,待10~20天左右即可进行采血,抗体的含量可达1~10mg/ml;

    3、小鼠腹腔注射适量佐剂后,将杂交瘤细胞按照1~2×10^6cell/只的量打进腹腔。在小鼠濒死时收集腹水,一只小鼠可获得5~10ml腹水,抗体含量可达5~10mg/ml。

    制备腹水单抗操作便利且产量大,因此是最常用的大量单克隆抗体生产的方法。

腹水制备实验流程

    1、常规是先腹腔注射Balb/c小鼠0.3~0.5ml降植烷或液体石蜡处理腹腔7~15天左右,将筛选出来的杂交瘤细胞株扩大培养后接种到Balb/c小鼠腹腔内;

    2、注射杂交瘤细胞7天左右小鼠腹部会开始肿胀,此时每日都应进行观察,以防小鼠突然死亡,当小鼠出现进食困难,行走不便,毛色暗沉时将小鼠处死,进行一次性腹水的提取;

    3、小鼠脱颈椎处死,于75%酒精浸泡消毒5min;

    4、用手术剪将小鼠腹部剪开一个小口,剥离周围皮肤露出腹腔,随后将腹腔剪开一个小口,将胶头滴管伸入腹腔内将积液吸取至干净的15ml离心管内;

    5、3000rpm,10min离心,无色透明的中间层即为腹水。

博奥龙腹水专用佐剂

    将腹水专用佐剂注射Balb/c小鼠腹腔,每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右(一般12-18天),然后注射杂交瘤细胞,建议每只注射0.8~1×10^6个。

    腹水会比普通佐剂晚出1.5~2天,但腹水的量是普通佐剂出量的1.5~2倍,且单抗腹水效价不变。

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