CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒DNA的片段整合到CRISPR序列中,并利用相应的CRISPR RNAs (crRNAs)来指导Cas9蛋白对同源序列的降解,从而提供免疫性。人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA(short guide RNA)引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA,可用于基因敲除和较精确编辑DNA等操作。
艾美捷Cas9核酸酶:在大肠杆菌中表达的重组化脓链球菌Cas9(wt)蛋白。
艾美捷Cas9核酸酶化学性质:
形式:液体
制备方法:E。大肠杆菌表达系统
纯度:≥ SDS-PAGE检测95%
活性:20 nM CRISPR/Cas9-C-NLS核酸酶在37℃下孵育1小时,通过琼脂糖凝胶电泳测定,底物DNA的消化率为90%。
推荐用法:CRISPR基因组编辑
最佳工作稀释度应由最终用户确定。
储存缓冲液:10 mM Tris、300 mM NaCl、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、50%甘油PH 7.4
储存说明:储存于-20°C。
等分试样以避免反复冷冻和解冻。
艾美捷Cas9核酸酶应用:
1、CRISPR Genomic
2、EditingElectrophoresis
图:用Cas9核酸酶进行电泳DNA切割试验。输入DNA是EcoRV线性化的pUC57质粒DNA。(1) DNA+gRNA(2)DNA+gRNA+10 ng Cas9(3)DNA+gRNA+25 ng Cas9