只能放在第一行，第二行就没有效果了。

1. 路径不同

#!/usr/bin/python3&& #!/usr/bin/env python3写在脚本语言第一行的目的是 想要以什么可执行程序去运行这个文件中的代码。
#!/usr/bin/python3是告诉操作系统执行这个脚本的时候，调用/usr/bin下的python3解释器；
#!/usr/bin/env python3这种用法是为了防止操作系统用户没有将python3装在默认的/usr/bin路径里。当系统运行到这一行的时候，首先会在env设置里查找Python3的安装路径，再调用对应路径下的解释器程序完成操作。
#!/usr/bin/python3相当于写死了python3路径;
#!/usr/bin/env python3会去环境设置寻找python3目录,推荐这种写法

2. 运行方式不同

这种写法在unix系统中表示这个脚本文件的默认启动程序，通常写在第一行，
其中 #!/usr/bin/python3 是那个程序的路径，# 符号在 shell、python 中均为注释的标志，将类似于 #!/bin/bash 的一行注释写在脚本文件的第一行，可以使脚本的使用更加方便。

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参考：

1. https://www.zhihu.com/question/372508221/answer/1021407407知乎
2. https://blog.csdn.net/fenglongmiao/article/details/80319875